NeuroScientific Biopharmaceuticals Ltd. merkte op dat de volgende aankondiging dient ter verduidelijking van de eerder gepubliceerde aankondiging van 15 juni 2022, om nadere informatie te verstrekken over de specifieke kenmerken van de studie die in de aankondiging vermeld werd. Het doel van de studie was om het effect van EmtinBTM in het myeline oligodendrocyte glycoproteïne-geïnduceerde experimentele auto-immune encefalomyelitis (MOG-EAE) muismodel van Multiple sclerose te beoordelen over een dosisbereik (5mg/kg, 10mg/kg, 20mg/kg en 40mg/kg) gedurende een behandelingsperiode van 30 dagen (Tabel 1). De resultaten van deze studie zullen worden gebruikt voor de keuze van de twee meest doeltreffende doses voor een grotere studie die in de loop van 2H 2022 zal worden uitgevoerd. De controlegroep bestond uit MOG-EAE muizen die niet met EmtinBTM behandeld werden. Deze muizen kregen een oplossing (voertuig) die identiek was aan het geformuleerde EmtinBTM, behalve dat het geen actief farmaceutisch ingrediënt van EmtinBTM bevatte. De eindpunten van de studie omvatten het volgende a) De dagelijkse beoordeling van klinische symptomen voor de duur van de studie (30 dagen) met behulp van een gestandaardiseerd scoringssysteem (tabel 2). Hogere scores betekenen ernstiger symptomen. (b) Analyse van de concentraties van neurofilament light polypeptide (NfL) in cerebraal spinaal vocht (CSF) en plasma op het eindtijdstip na de 30-daagse behandelingsperiode. (c) Kwantitatieve bepaling van de expressie van myeline basiseiwit (aangetoond met het antilichaam MBP) in weefselcoupes van ruggenmergweefsel op het eindtijdstip na de 30-daagse behandeling. d) Kwantitatieve bepaling van geactiveerde T-cellen (aangetoond met het antilichaam CD3) in weefselcoupes van ruggenmergweefsel op het eindtijdstip na de 30-daagse behandeling. (e) Kwantitatieve bepaling van microglia en macrofagen (gedetecteerd met het antilichaam Iba-1) in weefselcoupes van ruggenmergen op het eindtijdstip na de 30-daagse behandelingsperiode. (f) Kwantitatieve bepaling van astrocyten (gedetecteerd met het GFAP-antilichaam) in weefseldoorsneden van ruggenmergcellen op het eindtijdstip na de 30-daagse behandelingsperiode. Muizen die behandeld werden met 10mg/kg en 20mg/kg EmtinBTM behaalden consequent lagere klinische scores, wat wijst op een verminderde ernst van de ziekte, vanaf het begin van de symptomen en tot aan het hoogtepunt van de ziekte, in vergelijking met de onbehandelde controles. De klinische scores voor muizen die met 5mg/kg en 40mg/kg EmtinBTM behandeld werden, vertoonden meer variabiliteit en werden minder betrouwbaar geacht in vergelijking met de 10mg/kg en 20mg/kg EmtinBTM-doseringsgroepen. Neurofilament light polypeptide (NfL) is een biomarker die in verband wordt gebracht met beschadigde neuronen en die kan worden opgespoord in CSF en bloedplasmamonsters. Muizen die behandeld werden met 5mg/kg, 10mg/kg, 20mg, en 40mg/kg EmtinBTM hadden lagere concentraties van NfL in cerebrale spinale vloeistof (CSF) en plasmamonsters in vergelijking met de onbehandelde controlegroep aan het eind van de 30-daagse behandelingsperiode. Myeline is belangrijk voor de efficiënte werking van zenuwcellen. De vernietiging van myeline draagt bij tot het ontstaan van neurologische stoornissen die met MS gepaard gaan. Muizen die met 10mg/kg en 20mg/kg EmtinBTM behandeld werden, vertoonden consistent hogere myelinegehaltes in vergelijking met de onbehandelde controlegroep. De resultaten waren meer variabel voor muizen die met 5mg/kg en 40mg/kg EmtinBTM behandeld werden en werden als minder betrouwbaar beschouwd. In de studie werden een aantal markers beoordeeld die in verband worden gebracht met de chronische ontstekingsreacties van MS. Fundamenteel voor de disfunctionele immuunreacties van MS bij de mens zijn geactiveerde T-cellen (CD3) die de bloed-hersenbarrière binnendringen en de ontstekingsreacties van het CZS stimuleren,
waarbij residente immuunafweercellen zoals microglia en macrofagen (Iba-1), en astrocyten (GFAP) geactiveerd worden. 1 Muizen die behandeld werden met 5mg/kg, 10mg/kg, 20mg/kg en 40mg/kg EmtinBTM vertoonden na de behandelingsperiode van 30 dagen lagere niveaus van CD3-expresserende T-cellen in vergelijking met de onbehandelde controlegroep (Figuur 1A). Muizen die behandeld werden met 5mg/kg, 10mg/kg, 20mg/kg en 40mg/kg EmtinBTM vertoonden een lagere Iba-1 expressie in weefselmonsters, wat wijst op minder microglia en macrofagen, in vergelijking met de onbehandelde controlegroep na de 30-daagse behandelingsperiode (Figuur 1B). Muizen die behandeld werden met 5mg/kg, 10mg/kg, 20mg/kg en 40mg/kg EmtinBTM vertoonden een lagere GFAP-expressie in weefselmonsters, wat wijst op minder geactiveerde astrocyten, in vergelijking met de onbehandelde controlegroep na de 30-daagse behandelingsperiode (Figuur 1C).